鏈霉親和素(Streptavidin,SA)為Streptomyces Avicllrdi菌培養(yǎng)過程中的分泌產(chǎn)物。是大小為66KDa的四聚體蛋白,一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于10-14 mol/L數(shù)量級,是已知自然界中的非共價相互作用之一。其特別的結(jié)構(gòu)特性使其廣泛應(yīng)用于免疫學中ELISA檢測信號的放大。SA亦可用于免疫微孔板、免疫層析硝酸纖維素膜、基因芯片,快速固定生物素化的抗原、抗體、核酸等物質(zhì),偶聯(lián)NHS磁珠、樹脂微球,廣泛應(yīng)用于發(fā)光診斷、生物素化物質(zhì)分離、磁性試紙條免疫層析等方面。
貨號 | SEKF117 |
名稱 | 鏈霉親和素包被板 |
材料 | 聚苯乙烯 |
說明 | 透明,96孔板,預(yù)包被鏈霉親和素 |
檢測方法 | 比色 |
儲存 | 2℃-8℃ |
類型 | 檢測板,免疫分析,ELISA |
1
使用SA包被板進行的測定擴展了定量范圍,從而降低了稀釋需求,使其具有更寬的動態(tài)范圍;
2
標準曲線在檢測小生物素化分子(例如多肽和寡核苷酸)方面表現(xiàn)出更大的線性,使得測定精度更高;
3
孔板預(yù)先包被并封閉,可減少測定步驟、節(jié)省時間,同時提高了鋪板均一性,避免實驗誤差;
4
包被板以8孔聯(lián)排形式提供,可減少浪費。
01
測定包被板結(jié)合活性
1. 用200μL洗滌緩沖液沖洗預(yù)包被酶標板,每孔三次;
2. 準備1mg/mL的Bio-HRP溶液,用1:2000的稀釋度對第一孔進行1:2連續(xù)倍比稀釋,在室溫下孵育1小時;
3. 用200μL洗滌緩沖液清洗每孔4次;
4. 用100μL底物溶液室溫孵育15分鐘;
5. 加50μL終止液,測量每個孔的吸光度。
結(jié)果顯示:本公司所產(chǎn)SA包被板結(jié)合活性與X品牌及Y品牌平行,甚至更優(yōu)。
02
雙抗夾心法檢測
1. 用200μL的Wash Buffer洗滌預(yù)包被酶標板,每孔三次。在每孔中加入100μL生物素化捕獲抗體,在室溫振蕩孵育60分鐘;
2. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次,連續(xù)稀釋抗原,64ng/mL作為高點,同時設(shè)置0孔,每孔加100μL。在室溫振蕩孵育60分鐘;
3. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次。在每個孔中加入100μL一抗,室溫振蕩孵育60分鐘;
4. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次。每孔加入100μL酶標二抗。在室溫振蕩孵育30分鐘;
5. 用200μL的Wash Buffer洗滌每孔四次。每孔加入100μL底物溶液室溫孵育20分鐘;
6. 加50μL終止液,測量每個孔的吸光度。
結(jié)果表明:本包被板顯色更高,擬合曲線優(yōu)于X品牌及Y品牌。
03
穩(wěn)定性檢測
將包被好的SA板條放于37℃進行加速穩(wěn)定性實驗,放置16天(約4℃放置24個月),隨后取出進行結(jié)合活性檢測。
結(jié)果顯示:考核16天后,結(jié)合活性O(shè)D值變化不大且梯度良好,表明包被板穩(wěn)定性良好。
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 |
SEKF105 | ELISA套裝(含ELISA通用稀釋液/ TMB底物/濃縮洗滌液/終止液/ 封板膠紙/封閉液/包被液) |
SEKM-0007 | Mouse IL-6 ELISA Kit |
SEKH-0013 | Human IL-6 ELISA Kit |
SEKH-0013 (HS) | Human IL-6 (High Sensitivity) ELISA Kit |
SEKM-0002 | Mouse IL-1β ELISA Kit |
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