產(chǎn)品名稱(chēng):脂多糖(LPS)
產(chǎn)品型號(hào):L8880-10
產(chǎn)品特點(diǎn):脂多糖(LPS)外觀:白色微褐色絮狀凍干粉來(lái)源:Escherichia coli 055:B5溶解性:可溶于水(10mg/ml)或細(xì)胞培養(yǎng)基(1mg/ml),產(chǎn)生渾濁淡黃色溶液。
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Lipopolysaccharides From Escherichia coli 055:B5
L8880 脂多糖產(chǎn)品進(jìn)口分裝的,脂多糖效價(jià)大于等于500000 EU每mg,但每批產(chǎn)品效價(jià)有一定差別,我們產(chǎn)品主要是提供脂多糖的活性,相關(guān)應(yīng)用方面的實(shí)驗(yàn)需要客戶自己摸索和優(yōu)化。
脂多糖(LPS)說(shuō)明:
①脂質(zhì)和多糖的復(fù)合物;②為革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分,脂多糖是內(nèi)毒素的重要群特異性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分組成。脂質(zhì)A(Lipid A)為構(gòu)成內(nèi)毒素活性的糖脂,以共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)到雜多糖鏈,有兩部分:一是核心多糖,在有關(guān)的株內(nèi)是恒定的;另一O特異性鏈(O-specific chain)是高度可變的。大腸桿菌的脂多糖在實(shí)驗(yàn)室免疫學(xué)中是常用的B細(xì)胞促分裂因子即多克隆活化因子(polyclonal activator)。可用于細(xì)胞培養(yǎng)。
脂多糖(LPS)簡(jiǎn)介:
脂多糖,英文名稱(chēng)Lipopolysaccharides,簡(jiǎn)稱(chēng)LPS,是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種*成分,位于細(xì)胞壁的外層并暴露于非莢膜細(xì)菌的細(xì)胞表面,有利于維持細(xì)胞外膜的完整性,保護(hù)細(xì)菌免受膽汁鹽和脂類(lèi)抗生素的破壞。結(jié)構(gòu)上,脂多糖由類(lèi)脂A、核心多糖和O-多糖側(cè)鏈組成。其中類(lèi)脂質(zhì)A是構(gòu)成細(xì)菌內(nèi)毒素的主要成分,決定其毒性強(qiáng)弱;而O-多糖側(cè)鏈在不同細(xì)菌間是高度變化的,特異性決定細(xì)菌的血清型。
LPS可以引起免疫刺激的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和機(jī)體的毒性病理生理活動(dòng),包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。臨床常通過(guò)檢測(cè)LPS的存在來(lái)診斷腦膜炎。正是LPS與機(jī)體免疫機(jī)能的密切關(guān)系,生命科學(xué)研究常常提取LPS進(jìn)行相關(guān)的研究,如闡明LPS的結(jié)構(gòu),代謝,免疫學(xué),生理學(xué),毒性,生物合成途徑;誘導(dǎo)生長(zhǎng)促進(jìn)因子如白介素的合成與分泌;誘導(dǎo)疾病研究的動(dòng)物模型如炎癥反應(yīng),急性肺損傷。將LPS分別與FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反應(yīng)即可得到FITC、TRITC或TNP標(biāo)記的LPS,主要用于非胸腺依賴性B細(xì)胞對(duì)細(xì)菌LPS的免疫應(yīng)答研究。。
LPS可通過(guò)TCA、酚、酚-氯f(wàn)ang-石油醚等方法制備,其中后一種方法為粗提取法。TCA和酚提取得到的LPS在結(jié)構(gòu)上、電泳圖譜和內(nèi)毒素水平均較相似,不同之處在于含有的核酸和蛋白質(zhì)殘留量不同,TCA法得到的LPS含有約2%的RNA和10%的變性蛋白。酚法提取的LPS含有達(dá)60%的RNA和少于1%的蛋白。用凝膠過(guò)濾層析可除去酚提取LPS中的殘留蛋白,但是仍會(huì)留下約10-20%的核酸。進(jìn)一步用離子交換層析法純化可得到<1%蛋白和<1%RNA的LPS。
本品來(lái)源于血清型大腸桿菌O55:B55,用苯法提取而得。其內(nèi)毒素水平不少于500,000 EU (endotoxin units)/mg,經(jīng)分析,1ng相當(dāng)于5EU(鱟試劑法)和10EU(顯色法)。LPS O55:B55可用于刺激人腹腔巨噬細(xì)胞(1ng/ml)以及馬腹腔巨噬細(xì)胞的活動(dòng)(1-100ng/ml)。
來(lái)源:Escherichia coli 055:B5
溶解性:可溶于水(10mg/ml)或細(xì)胞培養(yǎng)基(1mg/ml),產(chǎn)生渾濁淡黃色溶液,溶于鹽溶液經(jīng)旋渦振蕩并加熱到70-80℃可得到一種濃度更高的LPS溶液(20mg/ml)。
使用方法:
1. LPS儲(chǔ)存液的配制,用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn):將1mg LPS重懸于1ml無(wú)菌平衡鹽溶液或細(xì)胞培養(yǎng)基,輕輕旋渦振蕩直粉末*溶解,即得到1mg/ml的儲(chǔ)存液。此儲(chǔ)存液可進(jìn)一步用無(wú)菌平衡鹽或細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋需要的工作濃度。
2. LPS儲(chǔ)存液的保存:本儲(chǔ)存液(1mg/ml)可放在4℃保存,約一個(gè)月穩(wěn)定;也可分裝成單次用量后放到-20℃,2年穩(wěn)定。避免反復(fù)凍融。
【注意】:1)LPS溶液應(yīng)儲(chǔ)存于硅烷化容器內(nèi),因?yàn)長(zhǎng)PS可吸附于塑料或某些玻璃器皿,尤其當(dāng)其濃度<0.1mg/ml時(shí)。但當(dāng)LPS濃度大于1mg/ml時(shí),上述吸附則可忽略不計(jì)。2)如使用玻璃器皿,則需旋渦振蕩LPS溶液少30min,以重溶被吸附溶質(zhì)。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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