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產(chǎn)品名稱(chēng):脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):BC2340

產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品特點(diǎn):脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:LPS 又稱(chēng)甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。

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BC2340脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒的詳細(xì)資料:

脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒

 

產(chǎn)品名稱(chēng): 脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: Lipase(LPS) Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào):BC2340          產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣       產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價(jià)格:420
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: 脂肪酶檢測(cè)試劑盒|LPS檢測(cè)試劑盒|脂肪酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹:
LPS 又稱(chēng)甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。 
    LPS 催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算 LPS 活性。

 
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容
試劑一:液體80mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,室溫保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:0.06mL×1支。臨用前加入1.5 mL無(wú)水乙醇,充分溶解配制成125 µmol/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,4保存。用前注意解凍溶解。

產(chǎn)品說(shuō)明
LPS又稱(chēng)甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS活性。

自備儀器和用品:
    研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、甲苯、無(wú)水乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>   
組織樣品:稱(chēng)取約0.1g樣品,加試劑一1.0 mL充分研磨,于4℃,15000rpm離心30min,取上清液待測(cè)。
血清樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟:

  1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)710nm,甲苯調(diào)零。
  2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預(yù)熱30min以上。
  3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋?zhuān)簩?25 µmol/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋為125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。
  4. 操作表:
加入試劑(mL)空白管測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管
試劑一0.3750.3750.375
試劑二0.1250.1250.125
反復(fù)震蕩混勻
蒸餾水0.2  
上清液/血清 0.2 
標(biāo)準(zhǔn)溶液  0.2
迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)10 min
甲苯111
反復(fù)震蕩混勻后,室溫4000rpm離心10 min
取出離心管,小心吸取上層溶液0.9 mL,加入另一2 mL塑料離心管中,按下表操作:
加入試劑(mL)空白管測(cè)定管標(biāo)準(zhǔn)管
試劑三0.2250.2250.225

反復(fù)震蕩混勻;室溫4000rpm離心10 min,小心吸取上層溶液800 μL,加入1mL玻璃比色皿,于710nm處測(cè)定吸光值。記為A空白管,A測(cè)定管,A標(biāo)準(zhǔn)管,計(jì)算ΔA測(cè)定= A測(cè)定管-A空白管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。
三、LPS活性計(jì)算

  1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制:以油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),ΔA標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b。將ΔA測(cè)定帶入方程,得到x(µmol/mL)
  2. 酶活計(jì)算:

(1)按蛋白濃度計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/mg prot) =x×V樣÷(Cpr×V樣) ÷T= 0.1×x÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/g 鮮重) =x×V樣÷(W×V樣÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
(3)按血清計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每毫升血清每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/mL 血清) =x÷T= 0.1×x。
V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,0.2 mL;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒;T:催化反應(yīng)時(shí)間,10 min。W:樣本鮮重,g;V提:提取液體積,1mL。
注意事項(xiàng):
1、甲苯有毒,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需佩戴手套和口罩。
2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中須遠(yuǎn)離火源。
3、當(dāng)吸光度大于1時(shí),建議將樣本稀釋后測(cè)量。


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相關(guān)文獻(xiàn):
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