產(chǎn)品名稱(chēng):脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品型號(hào):BC2340
產(chǎn)品特點(diǎn):脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定意義:LPS 又稱(chēng)甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。
免費(fèi)咨詢(xún):010-50973130
脂肪酶(LPS)活性檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:420
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 脂肪酶檢測(cè)試劑盒|LPS檢測(cè)試劑盒|脂肪酶|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
LPS 又稱(chēng)甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。
LPS 催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算 LPS 活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體80mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,室溫保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:0.06mL×1支。臨用前加入1.5 mL無(wú)水乙醇,充分溶解配制成125 µmol/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,4℃保存。用前注意解凍溶解。
產(chǎn)品說(shuō)明:
LPS又稱(chēng)甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS活性。
自備儀器和用品:
研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、甲苯、無(wú)水乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
組織樣品:稱(chēng)取約0.1g樣品,加試劑一1.0 mL充分研磨,于4℃,15000rpm離心30min,取上清液待測(cè)。
血清樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟:
加入試劑(mL) | 空白管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | |||||
試劑一 | 0.375 | 0.375 | 0.375 | |||||
試劑二 | 0.125 | 0.125 | 0.125 | |||||
反復(fù)震蕩混勻 | ||||||||
蒸餾水 | 0.2 | |||||||
上清液/血清 | 0.2 | |||||||
標(biāo)準(zhǔn)溶液 | 0.2 | |||||||
迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)10 min | ||||||||
甲苯 | 1 | 1 | 1 | |||||
反復(fù)震蕩混勻后,室溫4000rpm離心10 min | ||||||||
取出離心管,小心吸取上層溶液0.9 mL,加入另一2 mL塑料離心管中,按下表操作: | ||||||||
加入試劑(mL) | 空白管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | |||||
試劑三 | 0.225 | 0.225 | 0.225 |
反復(fù)震蕩混勻;室溫4000rpm離心10 min,小心吸取上層溶液800 μL,加入1mL玻璃比色皿,于710nm處測(cè)定吸光值。記為A空白管,A測(cè)定管,A標(biāo)準(zhǔn)管,計(jì)算ΔA測(cè)定= A測(cè)定管-A空白管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。
三、LPS活性計(jì)算:
(1)按蛋白濃度計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/mg prot) =x×V樣÷(Cpr×V樣) ÷T= 0.1×x÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/g 鮮重) =x×V樣÷(W×V樣÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
(3)按血清計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每毫升血清每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/mL 血清) =x÷T= 0.1×x。
V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,0.2 mL;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,需要另外測(cè)定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒;T:催化反應(yīng)時(shí)間,10 min。W:樣本鮮重,g;V提:提取液體積,1mL。
注意事項(xiàng):
1、甲苯有毒,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需佩戴手套和口罩。
2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中須遠(yuǎn)離火源。
3、當(dāng)吸光度大于1時(shí),建議將樣本稀釋后測(cè)量。
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