產(chǎn)品名稱:IPTG 溶液 (50mg/ml)
產(chǎn)品型號:I1020
產(chǎn)品特點(diǎn):IPTG 溶液 (50mg/ml)貨號 :I1020規(guī)格 :5mL保存 :-20℃避光保存儲存,有效期少 12 個月。產(chǎn)品說明 :IPTG 為安慰性誘導(dǎo)物,X-gal 為生色底物,二者共同用于藍(lán)白斑篩選。IPTG 可誘導(dǎo)載體 Lac 操縱子 DNA 區(qū)段合成 β-半乳糖苷酶氨基端片段, 該片段可與宿主細(xì)胞編碼的缺陷型 β-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)(α 互補(bǔ))
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IPTG 溶液 (50mg/ml)
貨號 :I1020
規(guī)格 :5mL
保存 :-20℃避光保存儲存,有效期少 12 個月。
產(chǎn)品說明 :
IPTG 為安慰性誘導(dǎo)物,X-gal 為生色底物,二者共同用于藍(lán)白斑篩選。IPTG 可誘導(dǎo)載體 Lac 操縱子 DNA 區(qū)段合成 β-半乳糖苷酶氨基端片段, 該片段可與宿主細(xì)胞編碼的缺陷型 β-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)(α 互補(bǔ))。 實(shí)現(xiàn)α 互補(bǔ)的細(xì)菌鋪在含有 X-gal 生色底物的培養(yǎng)基上,可形成藍(lán)色菌落。外源 DNA 插入質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后可破壞α 互補(bǔ)作用,將產(chǎn)生白色菌落。IPTG 也是常用的基因工程中重組蛋白表達(dá)的誘導(dǎo)劑。
此產(chǎn)品為 IPTG 用雙蒸水溶解過濾后配成的無菌溶液。
使用說明 :
蛋白表達(dá)誘導(dǎo) :50mg/mL 濃度為 210mM。如果終濃度要求為 0.5mM,則每升培養(yǎng)基中加入 2.38mL IPTG 溶液 (50mg/mL) 。如果實(shí)驗(yàn)中需要使用其他誘導(dǎo)濃度,可自行計算加入量。
藍(lán)白斑篩選 :
(1)在 100mL 的瓊脂培養(yǎng)基中,加入 500μL 的 X-gal 溶液(20mg/mL) 、250μL 的 IPTG 溶液(50mg/mL)和 100 μL 的 Amp(氨芐青霉素,100 mg/mL) ,制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 平板培養(yǎng)基。高壓滅菌后的培養(yǎng)基需冷卻 55℃以下時加入 X-Gal、IPTG 和 Amp,以防失活。
(2)實(shí)際上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培養(yǎng)基表面, 90mm 的平板,X-gal(20mg/mL)涂 40μL,IPTG(50mg/mL)涂 16μL。150mm 的平板加倍使用量,待涂布的液體干后就可以使用。細(xì)菌鋪板后,37℃培養(yǎng),可根據(jù)長出菌體的藍(lán)白色,而方便地挑選出基因重組體(白色菌落為具有 DNA 插入片段的基因重組體)。
注意事項(xiàng) :
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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